55夜色66夜色国产精品视频,亚洲中文无码,永久免费av无码网站性色av,把老师的批日出水了视频

您好!歡迎訪問保定米奇生物科技有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)咨詢熱線:

19801430409

當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > RNA建庫測序原理及文庫的構(gòu)建

RNA建庫測序原理及文庫的構(gòu)建

更新時(shí)間:2021-12-27      點(diǎn)擊次數(shù):1073
   一般生物體中的的RNA中,rRNA占絕大多數(shù),含量超過90%,而mRNA的含量在1-2%,左右,轉(zhuǎn)錄組測序文庫是以樣本的Total RNA為基礎(chǔ),從中提取mRNA構(gòu)建測序文庫,因此文庫構(gòu)建包括mRNA富集和碎片化、mRNA反轉(zhuǎn)錄、接頭添加和PCR富集等過程。
  mRNA富集
  在生物的Total RNA中,mRNA所占比例很低,絕大部份時(shí)核糖體RNA (rRNA),因此如果直接使用Total RNA進(jìn)行測序,得到的結(jié)果必然是不準(zhǔn)確的,因此需要先將Total RNA中的mRNA分類純化出來。
  轉(zhuǎn)錄組測序的文庫根據(jù)待測樣品的物種分為真核轉(zhuǎn)錄組和原核轉(zhuǎn)錄組。由于真核生物和原核生物mRNA結(jié)構(gòu)不同,因此在mRNA富集時(shí)所采用的方法也并不相同。
  真核生物mRNA中含有polyA尾結(jié)構(gòu),因此可以使用oligoT與其特異性的匹配,從而在Total RNA中特異性的富集mRNA。
  然而,原核生物并不像真核生物mRNA具有polyA的結(jié)構(gòu),因此,無法直接利用oligoT將mRNA純化出來,目前,提高原核生物中mRNA的量,最主要的方式是去除Total RNA中rRNA。
  由于測序儀器不能直接對RNA測序,所以還要反轉(zhuǎn)錄成cDNA
  鏈特異性文庫
  由于轉(zhuǎn)錄組文庫構(gòu)建過程中要將mRNA反轉(zhuǎn)錄為雙鏈的cDNA,因此,在測序時(shí),即會同時(shí)得到cDNA雙鏈的序列信息,這就消除了mRNA單鏈的特性,無法區(qū)分cDNA中的正義鏈和反義鏈。
  因此提出了另一種文庫構(gòu)建方式,鏈特異性文庫,其在文庫制備和測序中保留mRNA 的方向信息,使得有效數(shù)據(jù)增多,基因表達(dá)定量更準(zhǔn)確;基因注釋更準(zhǔn)確,新基因識別等分析更可靠;同該方法能夠鑒定與開放閱讀框反義的ncRNA、發(fā)現(xiàn)反義轉(zhuǎn)錄本。
  其建庫原理與普通轉(zhuǎn)錄組類似,不同之處在于合成第二鏈cDNA時(shí),用dUTP代替dTTP,此時(shí)第二鏈cDNA上布滿了含dUTP的位點(diǎn)。
  在接頭連接后用一種特定的酶,其可在尿嘧啶位置產(chǎn)生一個(gè)單核苷酸缺口,從而消化掉第二鏈cDNA,只保留第一鏈cDNA,隨后進(jìn)行PCR擴(kuò)增純化,得到只含第一鏈cDNA信息的文庫。
保定米奇生物科技有限公司
地址:保定市惠陽街369號保定中關(guān)村創(chuàng)新基地研發(fā)中心15層1508室
郵箱:info@michlab.cn
傳真:
關(guān)注我們
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關(guān)注我們的微信公眾號
了解更多信息
成人电影免费看| 亚洲熟女综合色一区二区三区| 亚洲色偷偷综合亚洲AV伊人| 国自产拍av在线天天更新| 亚洲精品无码久久毛片| 黑人巨大精品欧美一区二区免费 | 久久久久亚洲AV成人片一区| 末成年女av片一区二区| 国产精品天干天干综合网| 张开腿让我尿在里面(h)| 日产精品码2码三码四码区别 | 国偷自产一区二区免费视频| 少妇人妻无码永久免费视频| 国产亚洲午夜高清国产拍精品| 精灵梦叶罗丽第八季| 欧美熟乱第1页| 白洁一晚挨十二炮| 久久久久亚洲av成人网人人软件| 偿还HD韩国中文版| 将军与娇妻各种做高h| 凌晨三点看的片WWW高清| 亚洲精品国产精华液| 风韵诱人的岳欲仙欲死在线观看| 男人和女人亲吻视频| 成人国产片女人爽到高潮| 精品国产乱码久久久久久1区2区| 老头扒开粉嫩的小缝亲吻| 一本一道波多野结衣av视频| 首长含着她的胸挺进柔软里| 亚洲精品无码久久久久苍井空| 九爷少奶奶又发飙了| 少妇被多人C夜夜爽爽AV| 国产精品久久一区二区三区| 少妇被又大又粗又爽a片| 日本片在线看的免费网站| 娇妻当着我的面被4p| 夜色福利站www国产在线观看| 国产又黄又爽又湿的免费网站| 好爽…又高潮了免费毛片| 女人被狂躁到高潮视频免费软件| 公交车强摁做开腿呻吟h视频|